4月26日直播讲座|慢病毒搭配双荧光素酶报告系统在活体成像中的具体运用

慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的载体。其本身的特性决定了它的使用范围：比如它对分裂期细胞和非分裂期细胞均有感染作用、能够稳定表达以构建稳转细胞系等，这些特性让它作为良好的基因治疗载体被运用于临床研究。

Dual-Luciferase双萤光素酶报告基因检测系统的原理是在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。以Luciferase为核心，构建研究对象到相应位置，转染细胞，裂解细胞，分别加荧光素酶底物，用荧光测定仪检测荧光强度，通过数据得出基因表达量，从而确定构建序列的功能。双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。

基于慢病毒载体的优势以及双荧光素技术的运用，发展出了活体成像这一系统。活体成像发光技术是指小的哺乳动物体内利用报告基因表达（比如荧光素酶基因）所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP产生氧化反应，将部分化学能转化为可见光能释放，然后在体外利用敏感的CCD设备形成图像。这种生物发光的双标记系统，扩大了活体成像技术在干细胞和肿瘤方面的研究和运用。

为了让大家更好了解慢病毒搭配双荧光素酶在具体研究中的运用，吉凯基因在本次直播中就搭配双荧光素酶借助慢病毒让你更好了解靶基因变化为主题，邀请孔凡迪博士和章雨晨博士讲解双荧光素酶报告系统的原理以及搭配慢病毒在具体文献中的运用。