炎炎夏日即将到来，有没有感觉双手开始蠢蠢欲动了呢？没错！又到了年中冲刺实验的时候啦！基因分型、表达分析、基因克隆统统都要做，那我们该如何提高自己的核酸提取技能呢？今天就为大家细数核酸提取实验中“那些年我们一起踩过的雷”，还有快速实现避雷的干货指南，助你提高实验成功率哦！
核酸得率低
优先选取新鲜的组织，避免样本采集后反复冻融。
根据样本类型选择合适的样本前处理方式，保证组织样本被充分匀浆处理。
裂解液和样品混合不均造成细胞裂解不充分，建议间歇性涡旋1-2次。
洗脱液pH值不合适，调整洗脱液pH在7.0-8.5范围内使其获得最大洗脱效率。
适当增加洗脱时间和次数，洗脱液先在60-75℃预热10 min再进行洗脱，可有效提高洗脱效率。
保证漂洗液中加入足量的无水乙醇。
核酸纯度低
采集样本时要尽可能去除表面杂质残留。
适当调整样品上样量，保证样本量与裂解液配比在合适的范围内。
蛋白和盐离子残留量过多，可适当增加漂洗次数
晾干过程要充分，防止乙醇残留。
RNA残留过多，可适当延长RNase A的消化时间。
多糖多酚类植物样本可选择针对性的试剂盒开展实验，有效提高核酸提取的效率和质量。
核酸降解
采集样本存在核酸体内降解的情况，应优先挑选新鲜或幼嫩的样本。
RNA提取的样本前处理过程要保证在洁净、低温RNAase-free环境下进行。
存在外源核酸酶污染，实验应尽可能使用洁净的耗材和试剂。
组织裂解过程要充分，确保裂解液能充分裂解上样的组织量，避免上样量过高或过低。
选择合适的储存条件，长期保存推荐-80℃低温条件存储。
提取到的RNA可分装低温保存，避免核酸反复冻融。
以上列举到的是一些核酸提取实验中大家可能经常会遇到的问题，希望能够对奋战在实验室一线的小伙伴有所帮助。
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推荐试用有礼
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