合成人员在设计样品纯化方法时必经的步骤之一就是选择合适的上样方式。湿法上样是最简单的上样方式,但不适用于常见溶剂中溶解度不佳的样品。根据样品性质,选择不同的上样方式,才能达到事半功倍的效果。
湿法上样
湿法上样是实际应用中最经常使用的上样方式,液体样品和经溶解后的固体样品,直接注入色谱柱中即可完成上样操作,是最简单的上样技术。搭配Claricep系列高压柱和Claricep c-手拧系列或s-手拧系列,可以满足各式各样的纯化需求。
湿法上样也有一定的局限性。当湿法上样体积增大时,样品体积相对于色谱柱柱床的体积占比也会增大,扩散效应也会明显增强,会导致峰宽变宽、分离效率和纯度降低。此外,如果没有选用接近于起始流动相极性的溶剂溶解样品,极性过大时会导致样品不能充分与固定相作用,保留时间不够,也会影响分离效率。如果样品溶解度不佳导致上样体积过大或只能溶于大极性溶剂时,建议选择干法上样,以达到理想的分离效果。
干法上样通常用少量溶剂溶解后,加入约3倍左右样品量的硅胶拌匀,通过旋转蒸发仪去除溶剂后,得到样品-硅胶混合物用于上样。艾杰尔Claricep i-手拧系列预留固体上样空间,可以方便地打开直接上样至柱管中,也可自行手拧密封,较外接上样容器的方法来说死体积更小。
除了使用Claricep i-手拧系列进行固体上样以外,还可以选择将样品-硅胶混合物装入艾杰尔空柱管系列产品或固体上样器中,再安装到Flash柱的上端。相比于使用上端留空的Flash柱的方法来说,对样品-硅胶混合物的体积限制更小,允许更高的载样量,操作同样方便,效率高。
FCH-H系列
空柱管
FCH-C系列
空柱管
FCH-S系列
空柱管
SSL60固体上样柱
Claricep Flash中压纯化柱选择表