实验方法原理 | L-苹果酸:NAD 氧化还原酶,MDH。 L-苹果酸 + NAD+⇌ 草酰乙酸 + NADH + H+ 实验首选逆反应。 |
---|---|
实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98 ml 实验混合物 0.02 ml MDH 稀释溶液 25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。 展开 |
注意事项 | |
其他 | 试剂 0.1 mol/l 磷酸钾,pH 7.5 0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于 10 ml H2O) 0.1 mol/l 草酰乙酸(Mr=132.1,132 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/l 磷酸钾,pH 7.5 中) MDH 原料溶液(例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸钾 pH7.5 稀释至 1 IU/ml) 展开 |