测定猪肉中硝基咪唑类药物残留实验—气相色谱/质谱检测

正己烷乙酸乙酯-叔丁基甲醚

离心管Extrulet NT20柱涡旋混合器

1.  分析步骤

称取10.O g样品加6 mL缓冲溶液均质2 min，再加入8 mL缓冲溶液，37 ℃过夜。在4 ℃ 4000 r/min离心15 min，取出上清液，样品中再加入8 mL缓冲溶液，同上操作。合并上清液。

上清液用2 × 10 mL正己烷脱脂两次，弃去正己烷，剩余溶液调pH值到6.0，然后过Extrulet NT20柱，平衡20 min后，加入20 mL乙酸乙酯-叔丁基甲醚（1 + 1） 平衡20 min后，洗脱至离心瓶，再加入20 mL乙酸乙酯-叔丁基甲醚重复洗脱1次，洗脱液35 ℃以下旋转蒸发至近干，转移至5 mL具塞玻璃离心管用氮气吹干。

加入50 uL异辛烷和150 uL BSA，涡旋混合器混匀，50 ℃恒温水浴衍生化60 min，定容到10000 L，供气相色谱、质谱测定。

2.  色谱测定条件

色谱柱 I : 30 m × 0.25 mm × 0.25 um，DB-5MS， FinniganGCQ （离子阱）， 用于NCI和MS/MS测定。

色谱柱 n ：30 m × 0.25 mm × 0.25 um，DB-1， Hewlett Packard GC/MSD 用于 EI/MS测定。

进样口温度程序：60 ℃（1.5 min），12 ℃/min， 144 ℃，5 ℃/min， 184 ℃，25 ℃/min，290 ℃（6 min）；

载气：氦气，恒压模式，柱头压10 psi；不分流进样。

3.  质谱条件

电离源：EI；

传输线温度：280 ℃；

溶剂延迟：5 min；

离子源温度：150 ℃；

四极杆温度：100 ℃。

选择离子监测：二硝基咪唑（DMZ）监测离子 m/z：141、112、98；异丙硝唑（IPZ）监测离子 m/z：169、154、123；罗硝唑（RNZ）监测离子 m/z：214、 168、167、153；异丙硝唑代谢物（IPZOH）监测离子 m/z：242、226、196、 184；甲硝唑（MNZ）监测离子 m/z：228、197、182、167；甲硝唑代谢物（MNZOH）监测离子 m/z：316、315、314、272。