LB固体培养基
Tryptone 1g
Yeast Extract 0.5g
NaCl 1g
Agar 1.5g
加蒸馏水至总体积为100ml,高压蒸汽灭菌。灭菌后培养基不烫手时加入抗生素
2×YT培养基
Tryptone 1.6g
Yeast Extract 1g
NaCl 0.5g
加蒸馏水至总体积为100ml,高压蒸汽灭菌
10×SDS-PAGE电泳缓冲液
Tris碱 60.4g
Glycine 376g
SDS 20g
先加1.3L水,溶解后蒸馏水定容至2L
蛋白脱色液
冰醋酸100ml, 甲醇100ml, H2O至1L
1×PBS缓冲液
NaCl 4g
KCl 0.1g
Na2HPO4 · 12H2O 1.79g
KH2PO4 0.12g
先溶于400ml蒸馏水中,调PH值7.3,加水定容至500ml,高压灭菌
10×PBS配置直接将相应的成分×10,配制方法相同
Tris-Cl(1M)
用800ml蒸馏水溶解121.1g Tris base,加浓盐酸调PH至所需值
应使溶液冷至室温后,方可最后调定pH值。加水定容至1L。分装后高压蒸
汽灭菌。Tris溶液的pH值因温度而定,温度每升高1C,pH值大约降低0.03单位
6×SDS sample buffer
甘油(100%) 30ml
TrisCl(pH 6.8,1.0M) 15ml
EDTA(powder) 0.22g
SDS(powder) 6g
溴酚蓝 0.03g
DTT 0.6 mol/L
Store in aliquots at -20C
也可保存于室温,但是使用前加入1/20体积的巯基乙醇,使ME终浓度为715 mM
配制时用沸水浴或电磁搅拌器加热,烧杯顶部用锡纸封闭,防止水分蒸发
过滤除菌
30%丙烯酰胺
丙烯酰胺 60g
亚甲双丙稀酰胺 1.6g
加蒸馏水至200ml
TrisCl pH 8.8(1.5mol/L)
在50ml蒸馏水中溶解18.2g Tris base,用1mol/L HCl调pH至8.8,补加蒸馏水至100ml。4度保存
TrisCl pH 6.8 (1.0mol/L)
在50ml蒸馏水中溶解12.1g Tris based,用HCl调pH至6.8,定容至100ml
10%过硫酸胺(AP)
1g AP溶于10ml蒸馏水中。4C不能长期存放,一般2-3周
10%SDS
称取20gSDS慢慢转移到约含150ml的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至200ml
IPTG(1 M)
用8ml蒸馏水融解2.38g IPTG配制成1 M的溶液,用蒸馏水定溶至10ml。用0.22um过滤器过滤除菌,store -20C