34 不是所有的塞卡病毒都一样。2017年9月， 中科院遗传所的许执恒团队和军事医学科学院的秦成峰团队在Science上报导，prM蛋白的一个突变(S139N)增加了塞卡病毒的传染性，并引起更严重的小头症和更高的致死率。在该论文发表后一周内，Sabeti团队和张锋团队就设计、开发出几个能区分出S139N病毒突变的SHERLOCK分析方法，包括荧光或显色格式。图中Ancestral或Anc代表最早起源的野生型（139S）塞卡病毒，Derived或Der代表衍生的突变型（139N），DOM代表来自多米尼加的患者， HND代表来自洪都拉斯的患者。
图片来源：参考资料15
35 2018年10月，在Science的又一篇论文中，Doudna团队也用“钓鱼”的方法为DETECTR技术平台找到了一个新的工具:
Cas14。Cas14的第一个特点是它的个头小（40-70KD），不到其它Cas酶的一半，因而大规模生产该蛋白的难度相对较低。它的第二个特点是它只靶向单链DNA，激活后除了剪切靶ssDNA外，还非特异性地剪切其它ssDNA。
图片来源：参考资料2和12
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根据Cas14的第二个特点，他们设计了Cas14-DETECTR。由于Cas14-sgRNA只识别单链DNA，RPA扩增产物需要被转变为ssDNA。他们用了一个巧妙的方法：在扩增DNA时，一对引物中只有一个含有phosphorothioate
(PT)。扩增后，没有被PT保护的DNA链会被T7外切酶降解，而有PT保护的单链则幸存下来，继续被Cas14-sgRNA甄选。
图片来源：参考资料2和12
37 Cas14的第三个特点是它的识别序列没有PAM的限制，所以可以靶向任何序列。它的第四个特点是对识别序列中间的碱基的要求很严格，有一个错配就不能结合。也就是说，Cas14-DETECTR的特异性能达到单碱基，比Cas12-DETECTR的高（参照图25）。根据这一特点，Doudna团队用Cas14-DETECTR建立了高保真的SNP基因型分析方法。文中给的例子是区分蓝色眼睛和棕色眼睛的基因型。通过调控下游的OCA2基因，人的HERC2基因中第86个内显子的一个碱基的差别决定了眼睛颜色的差异：G是蓝色，A是棕色。通过对志愿者的唾液分析，他们可以迅速、准确地查出决定眼睛颜色的SNP基因分型。图中志愿者5-7的眼睛是蓝色
（GG纯和子），1-4的眼睛是棕色（1和2是AA纯和子， 3和4是AG杂合子）。
图片来源：参考资料2和12
38 至此，在CRISPR分子诊断技术中最常用的三个Cas系统已全部亮相。
图片来源：参考资料2
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