WCL的全称是whole cell lysate,中文就是全细胞裂解液对吧?如果是这样的话,这个部分的目的就是研究细胞里面你想要研究的蛋白表达情况.IP的就是你用抗体pull down以后得到的目的蛋白.
我们做co-IP研究A和B蛋白相互作用的时候,一般会在细胞里面转染质粒,分别表达A和B蛋白.等蛋白表达出来以后,裂解细胞,得到WCL,直接做western blotting,首先确定它们都能表达且表达量一致.剩下的会加A蛋白的抗体,将它IP下来,如果它与B蛋白有相互作用也会将B蛋白拉下来.这时再用B蛋白的抗体看看能否检测到B蛋白,就能研究AB有没有相互作用.你是做什么实验啊,可以简单说一下吗?这样才能帮你分析哈.如果你要诱导细胞的话,应该就是没有有诱导的细胞裂解液,我们一般加30ug左右全蛋白就可以跑出来条带了.
首页
