中药材分析用样品制备方法介绍

(1)超声提取法

超声波具有助溶作用,因此可用于样品中待测组分的提取。超声提取较冷法速度快,一般仅需数十分钟即可达到平衡。超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失,所以进行含量测定时,应于超声振荡前先称定重量,提取完毕后,放冷至室温,再称重,并补足减失的重量,滤过,取续滤液备用。

超声提取法简便,不需加热,提取时间短,适用于固体制剂中待测组分的提取。应用于药材粉末的提取时,由于提取组分是由细胞内逐步散出来,速度较慢,加溶剂后先放置一段时间,再进行超声震荡提取。

(2)回流提取法

回流提取法是将样品粉末置烧瓶中,加入一定量的有机溶剂,加热进行回流提取的方法。在加热条件下组分溶解度增大,溶出速率加快,有利于提取。回流提取法主要用于固体制剂的提取。提取前应将样品粉碎成细粉,以利于组分提出。提取溶剂沸点不宜太高,对热不稳定或具有挥发性的组分不宜采用回流提取法提取。回流提取法提取速度快,但操作稍繁琐。

(3)连续回流提取法

连续回流提取法适用索氏提取器连续进行提取,操作简便,节省溶剂,蒸发的溶剂经冷凝流回样品管,因其中不含待测组分,所以提取效率高。本法应该选用低沸点的溶剂,如乙醇、甲醇等,提取组分对热应稳定。

(4)萃取法

萃取法是利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度不同,使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中,经过多次萃取,将测定组分提取出来的方法。萃取法主要用于液体制剂中待测组分的提取分离。

萃取用溶剂应根据待测组分的溶解性来选择。待测组分应在其中溶解度大,而杂质应在其中溶解度小。溶质在有机相和水相的分配比越大,萃取效率越高。根据相似相容原理,极性较强的有机溶剂正丁醇等适用于提取皂苷类成分,乙酸乙酯多用于提取黄酮类成分,三氯甲烷分子中的氢可于生物碱形成氢键,多用于提取生物碱类成分,挥发油等非极性组分则宜用非极性溶剂乙醚、石油醚等提取。

水相的pH值可影响弱酸弱碱性物质在两相的分配。酸性组分提取的pH值一般应比其pK_a低1～2个pH单位,碱性组分提取的pH值则应比其pK_a高1～2个pH单位。

酒剂和酊剂在萃取前应先挥去乙醇,否则乙醇可使有机溶剂部分或全部溶解于水中。

(5)水蒸气蒸馏法

部分具有挥发性并可随水蒸气蒸馏出的组分,可采用水蒸气蒸馏法提取,收集馏出液供分析使用。挥发油、一些小分子的生物碱如麻黄碱、槟榔碱,某些酚类化合物如丹皮酚等可以采用本法提取。用本法提取的组分对热应稳定。

(6)超临界流体萃取法

超临界流体是指当压力和温度达到物质的临界点时,所形成的单一相态,如CO₂的临界温度为31℃,临界压力为7390kPa,当压力和温度超过此临界点的时,CO₂便成为超临界流体。

最常使用的超临界流体是CO₂,因为CO₂具有较低的临界温度和临界压力,同时还具有惰性、无毒、纯净、价格低廉等优点。本法适合于中药及其制剂中待测组分的提取分离,目前应用日益广泛。

使用超临界流体萃取仪提取时,将样品置于萃取池中,萃取池应恒定在试验温度下,用泵将超临界流体送入萃取池,萃取完毕后,再将溶液送入收集器中。

影响萃取的因素主要有温度、压力、改性剂和提取时间等。由于CO₂为非极性化合物,因此超临界CO₂对极性组分的溶解性较差。在提取极性组分时,可在超临界流体中加入适量的有机溶剂作为改性剂,如甲醇、三氯甲烷等。改性剂的种类可根据萃取组分的性质来选择,加入量一般通过实验来确定。