海光讲堂 | 五种常见硒形态的快速分析

摘要：在6分钟内实现五种常见硒形态：硒代胱氨酸((SeCys)2)、甲基硒代半胱氨酸(SeMeCys)、亚硒酸根离子(Se(IV))、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒酸根离子(Se(VI))的检测,最小定量浓度为2ng/mL。

应用领域：环保、食品、饮用水、公共卫生、生态毒理及科研等领域的硒形态分析。

1  实验条件

1.1  试剂

表1 试剂

注意：硒形态标准贮备溶液自行配制或外购。

1.2  仪器设备

表2 仪器设备

1.3  流动相配制

（1）将快速分析试剂包中的试剂置于烧杯中，加入25 mL甲醇和约 900mL 超纯水，搅拌溶解。

（2）用50%(v/v)甲酸溶液调节 pH 至5.5，用超纯水定容至 1000mL。

（3）用 0.45μm 有机系膜过滤，然后置于超声波清洗器中，真空泵辅助脱气30min。

1.4  硼氢化钾和盐酸溶液的配制

（1）硼氢化钾溶液（35g/L）：称取35.0g硼氢化钾，溶于1000mL 5g/L氢氧化钾溶液中，搅拌均匀。此溶液现用现配。

（2）20%盐酸溶液：移取200mL浓盐酸，用超纯水定容至1000mL，搅拌均匀。

（3）0.15%KI消解液：称取0.50g氢氧化钾，1.50gKI，溶于1000mL超纯水中，混匀。

1.5  标准溶液的配制

标准使用液，用流动相稀释至所需的浓度。

1.6  色谱-原子荧光联用仪的分析条件

表3  色谱分离条件

表4  原子荧光检测条件

2  分析结果

2.1  分离谱图

图1  2ng/mL (SeCys)2 、SeMeCys、Se(IV)、SeMet、Se(VI)分离谱图

图2  10ng/mL (SeCys)2 、SeMeCys、Se(IV)、SeMet、Se(VI)分离谱图

图3  100ng/mL (SeCys)2 、SeMeCys、Se(IV)、SeMet、Se(VI)分离谱图

图4 标准谱图叠加

2.2 数据及校准曲线

表 5 校准曲线测试数据

图5 硒代胱氨酸((SeCys)2)校准曲线(2、5、10、20、50、80、100ng/mL)

图6 甲基硒代半胱氨酸(SeMeCys)校准曲线(2、5、10、20、50、80、100ng/mL)

图7 亚硒酸根离子(Se(IV))校准曲线(2、5、10、20、50、80、100ng/mL)

图8 硒代蛋氨酸(SeMet)校准曲线(2、5、10、20、50、80、100ng/mL)

图9  硒酸根离子(Se(VI))校准曲线(2、5、10、20、50、80、100ng/mL)

2.3 重复性测试数据(手动进样)

表6  6次重复性测试数据

图10 100 ng/mL (SeCys)2 、SeMeCys、Se(IV)、SeMet、Se(VI)6次重复性测试谱图