实用干货丨还没放假呢，峰就先“瘫”了？快给柱子洗个澡吧！

今年的国庆节+中秋节

实现了3+7=8的奇迹！

最后一天，小编已经脑补了一万种

享受长假的姿势…

瘫要瘫得优雅，瘫出葛大爷的风采！

玩要玩得痛快，拯救景区KPI！

然而，最悲伤的事就是

假还没开始放，柱子先不行了…

我还没瘫呢，峰先瘫了…

明明之前结果是好的，

明明各种实验条件完全一致，

明明做过前处理……

为什么柱效就下降了？

难道说，实验室里真的有玄学？

别急，让SGLC来给你号号脉，

柱子柱效下降，多半是脏的！

看下面几个案例，你是否中枪了呢？

你是不是也遇到过以上情况呢？

离子对试剂、食品、中药……

对于某些项目，色谱柱很难逃脱污染的宿命

一般情况下，正常的柱头应该是这样的

如果出现了上述异常，

你的柱头很可能是这样的

（前方高能）

▽被污染的柱头君1号

△被污染的柱头君2号

真是闻者伤心，见者落泪

好好的一根柱，还能用么？

别急，掌握以下方法，还能抢救一下！

在液相分析过程中，柱子用了一段时间，常会遇到峰拖尾、峰前延、肩峰、峰分叉等头疼的问题，如果在相同条件下比较，通常都是色谱柱污染、柱头堵塞、固定相塌陷或柱头塌陷导致。其中如果筛板部分堵塞，直接影响样品液滴柱前变形，或柱压上升，此时通常建议将柱头拆下，将柱头放于异丙醇中超声20min。

而柱头塌陷，也会由于液滴的差速流动，导致变形，形成异常峰，如下图所示。此时较难修复，只能死马当作活马医，反接色谱柱使用，或者更换色谱柱。

即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完全避免柱子受到污染，因此有必要对柱子进行清洗。

1）常规冲洗方法

先用有机溶剂（甲醇或乙腈）和水混合溶液（溶剂：水=10：90）用小流速（正常使用流速的一半）冲洗20倍柱体积，再用纯甲醇用小流速（正常使用流速的一半）冲洗20倍柱体积。

2）特殊的冲洗方法

对于含有离子对试剂的流动相，冲洗方法如下：先用乙腈水混合溶液（乙腈：水=50：50）冲洗10倍柱体积，再用乙腈水混合溶液（乙腈：水=10：90）冲洗20倍柱体积，最后用纯乙腈冲洗20倍柱体积

对于生物样品污染的色谱柱，冲洗方法如下：先用添加了三氟乙酸TFA的乙腈水混合溶液冲洗（A：0.1%TFA,B:0.1%TFA乙腈混合溶液，从5%B——100%B）梯度洗脱3次。

先用乙腈水混合溶液（乙腈：水=90：10）冲洗20倍柱体积；如果杂质吸附太强，常规清洗效果不明显，可以加大水比例，增加洗脱强度，先用纯水：乙腈=50:50清洗20倍柱体积，再用95%乙腈清洗并封存色谱柱。

先用正己烷乙醇混合溶液（正己烷：乙醇=98：2）冲洗20倍柱体积；如果杂质吸附太强，常规清洗效果不明显，可以增加洗脱强度，分别用100%正己烷、100%乙酸乙酯、三氯甲烷甲醇混合溶液（三氯甲烷：甲醇=50：50）冲洗，分别冲洗10倍柱体积，当回归到最初流动相条件时，请务必先用异丙醇过渡。