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相比非手性化合物,一些手性化合物会在更低的浓度下过载。原因之一是溶解在固定相中的环糊精的量不同(5-50%)。与正常固定相上过载的经典前沿峰不同,环糊精固定相上过载表现为峰拖尾。即使未超出色谱柱容量,手性化合物过载也会导致分辨率降低。
例1是 Rt-βDEXsp 上的芳樟醇分离(图1)。柱上样品量约为 20 ng(图1A)。图1B展示了更高浓度的相同组分,柱上 样品量200ng。请留意,芳樟醇对映异构体开始拖尾,手性分离度略有损失。尽管 0.32mm 内径毛细管柱的最大样品容量通常为每个组分 400-500 ng,但手性化合物的峰形表明其在三分之一的样品量时已过载。这是因为可以与手性化合物相互作用的环糊精要少得多。图 1C 显示了柱上样品量 2 µg 时,明显的过载,导致的结果是极端拖尾和分离度变得很差。
图1:芳樟醇在 Rt-βDEXsp 色谱柱上的过载
例2是 Rt-βDEXsm 色谱柱上分离 2,3-丁二醇(图2)。我们在此处看到柱上 500 ng(图 2A)和柱上 25 ng(图2B)之间出现类似的过载和拖尾趋势。但由于异构体之间的分离非常好,分辨率的损失并不像例1那样明显,尽管我们可以看到更多的过载。
图2:丁二醇在Rt-βDEXsm 色谱上的过载
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