No.167 | 食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠以及脱氢乙酸的同时分析

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流动相：20 mmol/L 乙酸铵：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：各约0.1 mg/mL

进样量：10 µL

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流动相：20 mmol/L 乙酸铵：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：40 mg/mL

进样量：10 µL

样品：饮料样品：以水为稀释剂稀释至40 mg/mL；糕点样品：称取样品400 mg于10 mL容量瓶中，加5 mL水超声20min，冷却后加入400 µL 92 g/L的亚铁氰化钾和400 µL 183 g/L的乙酸锌溶液，加水定容超声5 min，离心，过滤。

为了进一步改善脱氢乙酸峰形及各物质间分离，我们尝试在国标流动相基础上加入2 mmol/L甲酸，同时为避免酸性物质保留过强，采用梯度洗脱的方式来进行分析。结果表示，本方法可在20 min内得到五种物质分离度大于4.9的良好分离结果，且各峰峰形均得到明显改善。但由于甲酸的加入导致出峰顺序有所改变，苯甲酸、山梨酸保留有所延长。

下图分别为采用此流动相方法分别对混合标准品和实际样品的分析结果。

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流动相：A：20 mmol/L 乙酸铵+2 mmol/L甲酸  B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：各约0.1 mg/mL

进样量：10 µL

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流动相：A：20 mmol/L 乙酸铵+2 mmol/L甲酸  B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：40 mg/mL

进样量：10 µL

样品：饮料样品：以水为稀释剂稀释至40 mg/mL；

糕点样品：称取样品400 mg于10 mL容量瓶中，加5 mL水超声20 min，冷却后加入400 µL 92 g/L的亚铁氰化钾和400 µL 183 g/L的乙酸锌溶液，加水定容超声5 min，离心，过滤。

为了缩短分析时间，我们也尝试使用GB5009.28-2016方法以及上面提到的国标原流动相基础上加甲酸的方法，使用4.6x150 mm规格的SUPERIOREX ODS色谱柱，对安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸混合标准品进行分析。如下面结果所示，使用150 mm柱长的色谱柱，可以缩短分析的时间。

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流动相：20 mmol/L 乙酸铵：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：安赛蜜、糖精钠、苯甲酸各约0.1mg/mL；山梨酸、脱氢乙酸各约0.067 mg/mL

进样量：10 µL

HPLC Conditions ：

色谱柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流动相：A：20 mmol/L 乙酸铵+2 mmol/L甲酸  B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

温度：35 °C

检测：PDA 230 nm

浓度：各约0.1 mg/mL

进样量：10 µL