分析测试百科网

搜索

分析测试百科网 > 行业资讯 > 微信文章

色谱柱性能再升级,完美解决生物大分子UHPLC-SEC分析难题!

东曹分离与纯化
2022.10.14

在重组蛋白的纯度检验、生物药的多聚体分析中经常会使用到UHPLC-SEC方法。但在进行微量分析时候,SEC色谱柱中的蛋白质有时会因非特异性吸附而导致定量和重现性出现问题。另外,在使用光散射分析多聚体质谱分析时,有时会因为柱流失产生的干扰物质而无法进行精确检测。东曹新一代UHPLC-SEC色谱柱TSKgel UP-SW3000-LS可以解决此类分析难题。




蛋白质非特异性吸附的对比


将微量的标准蛋白质混合溶液 (全部2.5 mg/次) 连续10次进样至UP-SW3000-LS色谱柱中,将第10次的洗脱峰面积作为100时的第1次的洗脱峰面积,并计算出蛋白质的非特异性吸附率。结果表明,TSKgel UP-SW3000-LS的非特异性吸附率约为2.5%,是现有产品UP-SW3000色谱柱以及其他市售UHPLC-SEC色谱柱的一半以下。





fbfc1165be778fc10194733edc5acdbf.png

图1.  不同色谱柱蛋白质非特异性吸附的对比

c178a3999526e3ef4e07a6a80dc39e06.png

根据使用TSKgel UP-SW3000-LS时的蛋白质非特异性吸附率进行反向推算,使用该色谱柱只需2次进样(老化处理)即可准确分离微量蛋白样品并可获得良好的重现性。





光散射检测抗体药物异质性


使用SEC法分析抗体药物的分子大小变异体时,由于UV检测可获得的信息有限,所以一般推荐通过光散射检测器进行分析。然而,在LS检测时,会因色谱柱流失而检测到尖峰噪声和鬼峰,而导致检测精度降低。TSKgel UP-SW3000-LS在设计上可抑制这类尖峰噪声和鬼峰的出现,进而能够准确的进行LS检测。


9895e4ca7e7c1e15ad8fbaac78c5b02c.png

图2. 与MALS检测器的联用分析

6fa0db45afad57ae3798e773726124a3.png





质谱分析时的柱流失情况对比


将质谱检测器连接到SEC分析系统对抗体分子大小变异体、糖链结构进行分析的应用越来越多。但同LS分析一样,MS分析也会因柱流失的影响导致分析困难。

使用TSKgel UP-SW3000-LS,在最初的色谱柱平衡过程中就能去除几乎所有脱落的干扰物质,在之后进样空白样品 (洗脱液) 时,柱流失也非常少,与市售其他品牌的UHPLC-SEC色谱柱相比,可获得重现性更好的基线。

496ac6f4d9be112be93821e54a71889e.png

0a709f20fbace34a4bae0bb910c9b47c.png

图3. ESI-MS应用时两种UHPLC色谱柱柱流失比较

7f4464577b9e6a9598a45b0e28d9f11a.png




TSKgel UP-SW3000-LS产品信息


eb57ec995ee721f3b142e9d094c6c9a9.png

如需了解该色谱柱的更多信息,请点击下方 "阅读原文" 下载产品介绍资料,也可联系我司销售人员👉TEL: 021- 34610856 (213)




b7ae3076d6c17d3e7b52c39cb8a47d3e.gif

参考国标GB/T 41436-2022测定指画颜料中三氯生和三氯卡班

药典应用│参照2020版中国药典分析青霉素钠

使用尺寸排阻色谱柱G6000PWXL-CP分离mRNA-LNP

SkillPak预装层析柱添新品,更易实现纯化工艺优化及放大

Tosoh Bioscience网络研讨会视频资源库上线了!


8e6530198a0bd8cd2cee686017f5c196.jpg

发布需求
作者
头像
仪器推荐
文章推荐