大阪曹達｜三耀精细
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在国家药品标准WS1-XG-015-2014加替沙星质量标准中，加替沙星有关物质的检测难度较大。
系统适用性要求：分离度溶液色谱图中，要求加替沙星出峰时间在30-40分钟，按8-氟代加替沙星、8-羟基加替沙星、加替沙星和加替沙星N-甲基物的顺序出峰，各物质间的分离度分别应不小于3.5、6.0、4.0。
用户在筛选了4个品牌的色谱柱后，最终只有大阪曹達CAPCELL PAK C18 MGII 3 μm 4.6×250 mm色谱柱能够满足加替沙星有关物质检测要求。
加替沙星分析中的难点
1、加替沙星出峰时间需在30-40分钟，但流动相中有机相比例的变化对主峰的出峰时间改变明显，可调整空间小。
2、加替沙星峰型拖尾，加替沙星与加替沙星N-甲基物之间分离度难符合标准要求。
实验条件
实验中样品配置方式与国家标准一致；
所有实验都在柱温30 ℃，进样量10μL，检测波长325 nm下进行；
为了满足加替沙星出峰时间在30-40分钟之间的要求，根据实际出峰时间调整流速；
三乙胺磷酸溶液配制方式与标准一致，根据实际分离效果调整流动相配比。
用户的最终选择
在经过色谱柱筛选和流动相摸索后，用户选择了大阪曹達CAPCELL PAK C18 MGII 3 μm 4.6×250 mm色谱柱，分析谱图及实验结果如下：
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 88 / 12
流速：1.0 mL/min
结论
按照国家药品标准WS1-XG-015-2014加替沙星质量标准中有关物质分析的方法，使用大阪曹達CAPCELL PAK C18 MGII 3 μm 4.6×250 mm满足系统适用性中加替沙星和加替沙星N-甲基物分离度≥4.0，加替沙星出峰时间30-40分钟的要求，且耐用性较好。
国家药品标准WS1-XG-015-2014
加替沙星质量标准
推荐用柱 F92483
CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250
在选用大阪曹達色谱柱的同时，用户也同时尝试了其他品牌的色谱柱
色谱柱2：Uxxx C18 5 μm，4.6×250 mm
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13
流速：1.5 mL/min
加替沙星（3）出峰时间（24.4min）不符合要求，加替沙星（3）和加替沙星N-甲基物（4）分离度（3.4）不符合要求，减少有机相比例进行新的尝试。
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 88 / 12
流速：1.5 mL/min
加替沙星出峰时间（32.9min）符合要求，加替沙星（3）和加替沙星N-甲基物（4）分离度（3.6）仍不符合要求，但分离度有增加的趋势，随之继续减少有机相比例进行尝试。
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 89 / 11
流速：1.5 mL/min
加替沙星（3）和加替沙星N-甲基物（4）分离度（3.7）仍不符合要求的情况下，加替沙星出峰时间（42.9min）要求已超出了标准要求的范围。
综上，从Uxxx C18 5μm，4.6×250 mm的实验结果判断，有机相比例的微小调整（1%~2%）会导致加替沙星出峰时间的大范围变化，在可调整的狭窄区间内，加替沙星（3）和加替沙星N-甲基物（4）分离度改善效果有限，达到标准中要求的4.0分离度有一定难度。
色谱柱3：Wxxx C18 5 μm，4.6×250 mm
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13
流速：1.5 mL/min
加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星峰严重拖尾，加替沙星N-甲基物未出峰。
色谱柱4：Dxxx C18 5 μm，4.6×250 mm
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13
流速：1.5 mL/min
加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星主峰明显拖尾
色谱柱5：Cxxx C18 5 μm，4.6×250 mm
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13
流速：1.5 mL/min
加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星和加替沙星N-甲基物分离度差标准要求的4.0太多。
色谱柱6：大阪曹達SUPERIOREX ODSII C18 5 μm，4.6×250 mm
流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13
流速：1.0 mL/min
加替沙星出峰时间（30.9min）符合要求，加替沙星和加替沙星N-甲基物分离度（4.0）符合要求；且8-羟基加替沙星、加替沙星分离度（6.4）符合要求。
为提高加替沙星和加替沙星N-甲基物之间分离度，减少有机相比例，并选择了粒径3 μm的色谱柱，才有了本文开头的良好结果。
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