核酸药物被认为是继小分子药物、抗体之后的现代新药第三次浪潮,已引起社会的高度关注。离子对反相色谱法是分离核酸药物的理想选择,BEH C18作为金标准也被大家所熟悉。随着寡核苷酸药物、mRNA长度增加,分离难度逐渐攀升。为了应对来自核酸分析中的各种挑战,在130Å孔径色谱柱基础上,Premier Oligonucletides BEH C18又增加了300Å色谱柱供选择,从而能够灵活满足实验室分析各种不同长度的寡核苷酸和mRNA的需求。
图1. Premier Oligonucletides BEH C18 300Å色谱柱
完整mRNA分⼦在分析之前通常先用选择性核酸酶(例如核糖核酸酶T1)酶解,释放出poly(A)尾,再用离子对反相色谱法来进行分析。使用大孔径Premier Oligonucletides BEH C18 300Å色谱柱和⾼效的乙酸辛铵离⼦对缓冲液后,长达150
nt的长链寡核苷酸也获得了理想的分离度(如下图)。该色谱柱采用MaxPeak高性能表⾯技术,提高了分析物的重现性和回收率。该方法使⽤简单而稳定的UV检测,也适合用作质量控制分析。
图2. IP RP LC⽅法分离100 nt oligo(A)合成RNA寡核苷酸标准品(⿊⾊⾊谱图)。核糖核酸酶T1酶解的EPO mRNA(蓝⾊⾊谱图)和核糖核酸酶T1酶解的Fluc Beta mRNA(红⾊⾊谱图)的结果,使⽤ACQUITY Premier BEH寡核苷酸分析专⽤柱(300Å, 1.7 µm)。EPO mRNA poly(A)尾系列峰中丰度最⾼的峰对应于⻓度为124 nt的物质。Fluc Beta mRNA poly(A)尾峰组中丰度最⾼的峰对应于⻓度为128 nt的物质。
为让实验室的小伙伴们更了解Premier Oligonucletides BEH C18 300Å色谱柱,我们邀请了沃特世大中华区消耗品部高级市场专员彭端、沃特世大中华区大分子应用科学家于国强和大家一起多维度分享沃特世核酸分析解决方案,欢迎大家扫描下方二维码报名讲座,踊跃参与谈论!
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讲座时间:
2023年5月16日(星期二),14:00 - 16:00
内容概要:
MaxPeak HPS技术与Premier Oligo BEH C18 300Å色谱柱介绍
Premier色谱柱在寡核苷酸药物、mRNA等领域的应用
LC和LCMS技术在核酸分析中的应用
主讲人:
彭端
沃特世大中华区消耗品部高级市场专员
2017年加入沃特世消耗品部门,有扎实的色谱知识和仪器使用经验,对液相色谱方法开发、色谱柱选择与使用有丰富的经验。
于国强
沃特世大中华区大分子应用科学家
硕士毕业于四川大学华西医学院,一直从事核酸分析工作7年,2021年加入沃特世大分子应用团队,在核酸液质分析、蛋白分析等前沿热点领域,拥有丰富的方法开发经验。