转染是大部分细胞实验室都会进行的常规操作，不过，要想转染效率高，细胞活力好，省事又省力可是不容易。今天，我们走访了A大的细胞重点实验室，来听听大家对转染的想法~
问题一：
转染过程中遇到最大的困难是什么？
最大的困难就是遇到难转染的细胞，比如免疫细胞，原代细胞，干细胞这种，转染效率实在是太低了
我平时转染的细胞类型非常多，不知道怎么针对性的选择最适合的转染试剂。
问题二：
对于难转染这个问题，有没有考虑过使用电转的方法？
当然想过，但是电转想想就很复杂，哪有转染试剂方便易操作呢。
如果电转可以治疗我的选择困难症，我当然愿意了。
问题三：
理想的电转仪是什么样的？
操作方便，省时省力排第一
内置多种protocol，还能随时修改各种参数的，最适合我这种细胞类型多的了。
可是，真的有这样的电转仪吗？
别急，这不就来了吗？
Neon NxT电转染系统
Invitrogen™ Neon™ NxT电转染系统是新一代电转染平台，它采用创新设计，极大简化了哺乳动物的细胞转染流程。Neon NxT专有的移液器吸头技术通过最大化两个电极之间的距离，同时最小化其表面积，保证样本具有：
更均匀的电场
更少的离子形成
更小的pH变化
可忽略不计的发热
从而实现卓越的电转染效率和细胞活力。同时操作简单，仅需 3 个步骤：吸样、电转染和分液即可完成。
图1. Neon NxT电转染系统
Neon NxT现推出免费试用活动。点击阅读原文或识别下方二维码，即可申请免费试用。成功完成试用，并给出试用反馈，即可获得限量版大号鼠标垫或冰箱贴留言板。
申请后会有销售代表和您联系，沟通试用细节。
礼品数量有限，先到先得。
福利放送结束，让我们再回到细胞实验室，看看在电转实验中，大家还会遇到哪些问题。
01
场景一：小C用电转仪转染原代细胞，第二天观察发现，细胞死了一大半，无法进行下游实验.
分析原因：传统的比色皿式电转仪，对细胞伤害较大，造成大量细胞死亡。在比色皿中进行电转，电场不均匀，pH变化大，加上将细胞移进和移出的过程中，细胞多次经受剪切力，导致原本脆弱的细胞更加脆弱，最终导致细胞死亡。
解决方案：对于脆弱细胞，推荐使用温和的电转系统，如Neon NxT电转染系统。该系统采用专有的电转染吸头技术，电极间隔较宽，且表面积极小。较小的表面积产生更均匀的电场，并且pH值变化极小。转染过程中产生的热量和离子较少，因此细胞生理条件不会受到严重干扰。Neon NxT省去了将细胞移进和移出比色皿的步骤，减少细胞受到的剪切力。
02
场景二：小L使用电转仪推荐的电转参数，总是达不到理想的转染效率
分析原因：虽然很多电转仪自带针对不同细胞系的实验方案，但是，具体实验条件千变万化，任何微小条件都可能影响实验结果，还需要在此基础上进行参数优化。
解决方案：推荐选择可以灵活调节电转参数的电转仪，快速微调特定参数以优化流程。使用 Neon NxT 电转染系统，可以精确地控制重要的实验参数，无需浪费宝贵的时间去调整不重要的参数。
使用Neon NxT电转染系统，您可以获得：
1
可靠的性能和极佳的细胞活力
专有的电转染吸头技术，可帮助您自信地转染具有挑战性的细胞系并保持细胞活力。
图2. Neon NxT电转染系统的转染效率。在10 µL或100 µL电转染反应中，采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。转染效率为GFP阳性细胞的百分比（n＝3）。注：初始T细胞仅在100 µL反应中进行电转染。
图3. Neon NxT系统电转染后的细胞活率。在10 µL或100 µL电转染反应中，采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。用Invitrogen™ SYTOX™红色死细胞染色剂对转染细胞进行染色，并在Invitrogen™ Attune™ NxT流式细胞仪上评估细胞活率。细胞活率（%）以3次测量的平均值报告。注：初始T细胞仅 在100 µL反应中进行电转染。
2
节省珍贵的样本
Neon NxT 电转染系统的电穿孔过程发生在移液器吸头内，而非比色皿内，最大程度地减少样本损失和细胞承受的剪切力。
3
节省研究时间
Neon NxT 系统仅需 3 个简单的步骤：吸样、电转染和分液。孔板设置模式可设置不同参数条件，20 分钟内可对24 份样本进行电转染。
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灵活易用
采用 Neon NxT 电转染系统，可以精确地控制重要的实验参数，无需浪费宝贵的时间去调整不重要的参数。
使用 Thermo Fisher Connect 上 的Invitrogen ™ TransfectionLab ™基于云的应用程序优化电转染参数，提高生产率和可追溯性。在输入详细实验信息后，将会生成从设计阶段开始为您的实验量身定制的分步指南。
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