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贮存色谱柱
• 色谱柱的贮存条件会影响色谱柱寿命
• 切勿将色谱柱贮存于缓冲液或离子对试剂中
• 使用至少 5 倍于柱体积的流动相（不含缓冲盐）进行冲洗以去除所有缓冲液或盐
硅胶基质 HPLC 色谱柱的贮存条件
*在保存于贮存溶剂前使用 50 mL HPLC 级水冲洗色谱柱
色谱柱清洗流程
由于固定相与样品组分之间会发生相互作用，所以 HPLC 色谱柱偶尔可能需要清洗或再生。以下条件适用于 Phenomenex 硅胶基质色谱柱，但手性色谱柱除外。
• 流速应是典型流速的 1/5 - 1/2
• 要估算色谱柱的柱体积，请使用下面的公式：
非键合硅胶色谱柱 (Si)
使用 10 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
正己烷、二氯甲烷、异丙醇、二氯甲烷、流动相
除水：使用 30 mL 2.5 % 2,2-二甲氧基丙烷和 2.5 % 无水醋酸的正己烷溶液冲洗色谱柱。
反相色谱柱（C18、C12、C8、C5、C4、C2、C1、PHENYL、PFP、CN、NH2）
使用 10 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
95 % 水/ 5 % 乙腈（用于去除缓冲盐）THF 95 % 乙腈/ 5 % 水流动相
反相蛋白/肽类色谱柱（C18、C12、C8、C5、C4、Phenyl）
使用 20 倍于柱体积的流动相（不含缓冲盐）进行冲洗。
运行梯度 (2x)：
(A) 0.1 % TFA 水溶液、(B) 0.1% TFA 乙腈/异丙醇溶液 (1:2)，在 30 min 内从 25 % B 变为 100% B使用 10 倍于柱体积的流动相进行平衡。请勿将柱贮存在 TFA 中。
键合正相色谱柱（CN、NH2、DIOL、PAC）
使用 10 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
氯仿、异丙醇、二氯甲烷、流动相
例外：用于反相模式时，建议使用下述溶剂清洗 Luna Amino：
1. 使用至少 30 倍于柱体积的氢氧化钠(pH 11.0) 清洗
2. 使用至少 30 倍于柱体积的水冲洗（ HPLC 级）
3. 重新平衡至流动相条件。
适用于蛋白分析的 GFC/SEC 色谱柱(Yarra SEC、BIOSEP-SEC-S)
使用 5 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
0.1 M 磷酸盐缓冲液 (pH 3.0)。
对于强保留蛋白：
运行 100 % 水 - 100 % 乙腈 - 100 % 水（60 分钟以上）或使用 5 倍于柱体积的 SDS 或 6 M 硫氰酸胍或 10 % DMSO进行清洗。
请勿反向冲洗色谱柱！
离子交换（SAX、SCX、NH2、WAX、WCX）
使用 10 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
500 mM 磷酸盐缓冲液 (pH 7)、10 % 乙酸 (Aq)、5 倍于柱体积的水、10 倍于柱体积的磷酸盐缓冲液 (pH 7)、5 倍于柱体积的水、10 倍于柱体积的甲醇、10 倍于柱体积的水
对于蛋白去除，除以下步骤外请按照上述流程进行：
使用 10 倍于柱体积的 5 M 尿素或 5 M硫氰酸胍替代 10 倍于柱体积的甲醇。
HILIC
使用 10 倍于柱体积的以下溶液冲洗：
95 % 水/ 5 % 乙腈（用于去除缓冲盐）、95 % 100 mM 乙酸铵 (pH 5.8)/5 % 乙腈、95 % 水/5 % 乙腈流动相
注意：使用无水易燃有机溶剂的HPLC 色谱柱（例如正相、手性、GPC）会产生静电，因此要正确接地以避免潜在的放电危险。
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