八一建军
中国人民解放军建军纪念日
本实验根据GB 23200.92-2016，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱的方法，在多反应监测(MRM)模式下建立了动物源性食品中五氯酚钠残留量的测定方法。样品中的五氯酚钠经异丙醇提取，Cleanert PAX固相萃取柱净化，Venusil MP C18色谱柱（3.0 × 50 mm，3 µm，100 Å）分离，5 mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结果表明，五氯酚钠添加量为2.5 µg/kg条件下，猪肉基质回收率高于80%，牛肉基质回收率高于70%，能够满足检测要求。
样品信息
仪器、试剂与材料
色谱纯甲醇；分析纯氢氧化钠、分析纯异丙醇；色谱纯乙酸铵；色谱纯甲酸
固相萃取小柱：Cleanert PAX (60 mg/3 mL)
实 验
部分
实验方法
样品制备
5%氨水溶液：量取200 ml浓氨水（25%），
转移入1000 mL容量瓶，用水定容至刻度，混合均匀。
4%甲酸甲醇溶液：量取10 ml甲酸，转移入250 mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。
2%甲酸甲醇水溶液：取一定量4%甲酸甲醇溶液与水等体积混合均匀。
样品提取
称取2 g均质好的样品置于50 mL离心管中，加入2 mL
纯净水，涡旋混合 ；加入400 µL 10 mmol/L NaOH，涡旋混合；加入4玻璃珠粒均质子及5 mL异丙醇剧烈震荡2 min，再次加入5 mL异丙醇剧烈震荡2 min后再次加入5 mL异丙醇剧并烈震荡2 min；并于8000 rpm条件下离心5 min，取上清液备用。
样品净化
先将Cleanert PAX (60 mg/3 mL)小柱分别用5 mL甲醇、
5 mL 水活化平衡后，将上清液过柱，弃去流出液。依次用5 mL 5%氨水、5 mL甲醇、5 mL 2%甲酸的甲醇水溶液淋洗，淋洗液完全通过小柱后，弃去流出液，用真空泵抽干固相萃取柱5 min以上。以5 mL 4%甲酸的甲醇溶液洗脱，洗脱液在40℃条件下氮吹干，用1 mL甲醇复溶，溶液以0.22 µm PTFE-Q 滤膜过滤上样。
基质混合标准工作溶液配制
取高浓度五氯酚钠标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成5 ng/mL的基质混合标准工作溶液。
色谱条件
流动相：A相：5 mmol/L乙酸铵水溶液；B相：甲醇
流速：0.4 mL/min
柱温：30.0℃
进样量：20 µL
梯度洗脱：
质谱条件
离子源：电喷雾离子源
扫描方式：负离子扫描
电喷雾电压：-4500 V
雾化气压力：35 psi
气帘气压力：20 psi
辅助气压力：60 psi
离子源温度：550℃
采集方式：多反应监测(MRM)
Q1、Q3均为单位分辨率
实验部分
实验谱图
实验部分
结果与讨论
均质后的组织存在遇到提取溶剂紧缩的情况，这给提取造成了难度，因此本实验先将均质后样本吸水后再加入均质子，剧烈震荡后分步添加提取溶剂，避免了提取不充分的情况。如果操作者希望能够缩短实验中异丙醇过柱时间，可以尝试进行减压浓缩后过柱。由于时间的原因本实验未进行减压浓缩过柱测试。
使用有刻度的氮吹管时可参照国标的氮吹定容方式，但请注意校准氮吹管容积。该方式能够显著缩短干燥周期，而且对回收率的提高可能会有所帮助。
实验部分
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