在进行分析样品制备时,通常要对样品进行过滤预处理,以去除样品中的颗粒物,防止昂贵的色谱柱被堵塞!滤器虽小,但是却对我们的实验结果有着重大的影响。在实际的分析样品过滤的实验过程中可能会出现各种问题: 滤器不纯净,有杂质溶出,干扰分析结果?样品截留效果不可靠?滤膜的吸附性高,造成样品损失?过滤速度慢,太费力气?……
怎么办?小编来给您支招!
01
如何避免溶出和出现额外的杂质峰?
首先滤器本身应该在洁净条件下生产,且生产过程安全可控,没有切割粉末,保证自身没有杂质。
其次,重点考虑滤膜材质,以及滤膜和外壳的化学兼容性。例如,RC膜耐PH范围 3-14,适用于有机溶剂/混合溶剂和水溶液,如DMSO 和酮类/酯类/醚类等常用有机溶剂均可过滤;而PVDF滤器在过滤乙腈溶液时容易出现杂峰,见下图。因为Minisart RC使用可再生的原材料生产,纯净度高,不含表面涂层,非常稳定;滤器的外壳材质为聚丙烯PP,化学兼容性强,可进行高温高压灭菌或环氧乙烷灭菌,非常适合分析样品的过滤。
温馨提示:在实验之前,最好查询您使用的滤器是否耐受某pH,或是否耐受某特定的有机溶剂!
02
滤器的截留效果不佳?
滤器要100%经过完整性测试,出厂前需要经过Burst Pressure测试。同时也要考虑滤器与样品的化学兼容性。如果滤器与样品不兼容,可能会破坏滤膜结构,从而使滤器的截留效果不佳。
03
如何提高样品回收率?
根据过滤样品体积合理选择相应规格的滤器,比如您若只需要过滤1ml左右的样品,尽量选择4mm的小滤器。
尽量选择低吸附的膜。不同的膜材质,非特异性吸附的表现有差异。例如:再生纤维素膜(RC),它是一种亲水性膜,因此Minisart RC对带有疏水基团的蛋白等样品的非特异性吸附非常低,可有效地提高样品的回收率。
还有一个小窍门,过滤完成后可以用针筒打一次空气,帮助样品再次排出。
04
实验结果时好时坏,重复性差?
我们选择的滤器要通过HPLC认证,并且每一批次都应有纯度验证报告,以避免批次间的不均一。比如Minisart High Flow,Minisart RC,Minisart NY,Minisart SRP 均有HPLC纯度的认证报告。
05
如何轻松过滤?
购买滤器时需考虑其流速,可参考相同压力下与其他滤器的流速比较。比如Minisart RC 滤器无论过滤水还是有机溶剂其流速均更快,过滤更加轻松省力。
合理选择滤器孔径。比如,如果我们使用的是HPLC可选择0.45um的滤器,而如果是UHPLC则选择0.22um的滤器。再比如较粘稠的样品,或杂质较多的样品,可相应选择较大孔径的滤器或双层滤器先进行预过滤。
使用高通量的过滤设备。如果您的样品较多,又比较难过滤,高通量的过滤设备可以显著提高您过滤的工作效率。例如,可同时过滤8个样品的过滤小排Claristep。
如果您也有这些分析样品过滤的困扰,
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