二、氯乙酸AS-D荼盼醋酶染色
染色原理
血细胞内的氯乙酸AS-D荼酚酯酶(naphythol AS-D chloroacetate esterase,
NAS-DCE)水解基质液中的氯乙酸AS-D荼酚，产生AS-D荼酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。本试验常用的重氮盐为坚牢紫酱GBC，形成的有色沉淀为红色。
试剂器材
1.10%甲醛甲醇固定液
甲醛 25mL
甲醇 75mL
混合后置4℃冰箱保存。
2.Veronal醋酸缓冲液
甲液：
醋酸钠(含3H2O) 1.94g
巴比妥钠 2.94g
蒸馏水 100mL
乙液：
0.1mol/L盐酸 取盐酸(比密1.190g/L)0.85mL加蒸馏水至100mL。
取甲液50mL，乙液45mL，再加蒸馏水135mL，用1mol/L盐酸调pH至7.5~7.6。
3.基质液
氯乙酸AS-D荼酚 100mg
丙酮 0.5mL
蒸馏水 5mL
Veronal醋酸缓冲液 5mL
固酱紫GBC盐 10 mg
不必过滤立即染色，一次用完。
4.苏木素染液。
操作步骤
1.固定新鲜干燥的涂片在固定液中30 s~1min，蒸馏水冲洗，待干。
2.显示放入基质液(37℃)30min，自来水冲洗。
3.复染苏木素染液复染5mn，自来水冲洗，待干，镜检。
注意事顶
1.冬季室温低，茶酚和固酱紫GBC盐不易溶解，可放37℃温箱促溶。
2.茶酚在丙酮中溶解后再加其他液体。
3.NAS-DCE不被氟化钠抑制。
4.此酶染色后的标本易脱色，不能长期保存。
实验评价
NAS-DCE阳性反应几乎仅出现在粒细胞、较POX染色更具有特异性，因此又称为"粒细胞酯酶"、"特异性酯酶"。故该酶较特异地识别粒细胞系，有助于急粒和急单的鉴别，特别是对某些POX反应较强的单核细胞白血病鉴别意义更大。
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