色谱柱是液相分析的核心，一根性能正常的色谱柱是做好分离分析的前提。在上一期中，我们跟大家分享了色谱柱与仪器匹配使用的重要性，本期我们将结合实例为大家说明仪器对色谱柱性能的影响，以保证之后在做新色谱柱验收时，得到一个准确的结果。
实例分享
客户新购买的三只色谱柱在测实际样品时发现峰拖尾，之后请客户使用中性化合物复核柱效，峰形依然不好，这是不是色谱柱的质量问题？见图一。
图一
之后将色谱柱返回沃特世实验室，检查发现色谱柱性能正常。见图二。
图二
比较不同实验室测试结果发现，仅仅是更换了不同仪器，拖尾现象便得到了解决。这是因为不同仪器的死体积不同，而死体积会直接影响柱效测试结果。除了系统固定的死体积外，也应该注意沃特世色谱柱因柱硬件设计上与其他厂家不同。因此在将色谱柱连接到仪器上时，一定要注意图三所示的管线长度，以免引入额外的死体积而导致峰形拖尾，尤其当使用小颗粒色谱柱或柱体积较小的色谱柱时，死体积对柱效及峰形的影响将更加明显。
图三
图四. 不同规格色谱柱
除此之外，当使用小颗粒色谱柱时，还应该注意检测器采样频率对峰形的影响。以1.7 μm，2.1×100 mm规格的色谱柱为例，设置不同的采样频率时所得结果见图五。采样频率在10 Hz以上时柱效明显改善，一般建议使用20 Hz，若设置太高也可能导致基线噪音变大，可结合实际需求设置。
图五
Tips
在发生新色谱柱验收不合格时，我们建议：
1）考虑是否是色谱柱的连接问题，包括色谱柱柱前、柱后及检测器入口端等易引入死体积的位置。
2）若待测物的分析时间在5 min内出峰，可通过调整流动相比例将出峰时间延长至5 min后复核。
3）若是小颗粒色谱柱（如1.6/1.7 μm）或柱体积小的色谱柱（如3.5 μm 2.1×100 mm)等，注意检测器采样频率的设置是否合适。
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