解决方案 | 猪肉、鸡肉中甲氧苄啶的分析方法

艾杰尔飞诺美

2020.8.21

作者艾杰尔飞诺美

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摘要

本实验参考GB 29694-2013方法建立了猪肉和鸡肉中甲氧苄啶的前处理方法，采用固相萃取（SPE）结合高效液相色谱（HPLC）对猪肉和鸡肉中的甲氧苄啶进行了测定。样品经乙酸乙酯提取后，用0.1 mol/L的盐酸溶液转换溶剂，正己烷除脂，再用PCX小柱（60 mg/3mL）进行净化，Gemini NX-C18 (5 µm，4.6 × 250 mm) 色谱柱进行检测，外标法定量。结果表明，当加标量为10 µg/kg时，回收率在90% ~ 105%之间，能够满足检测要求。

样品信息

表1.样品信息

样品名称

结构式

分子量

CAS编号

甲氧苄啶

290.3

738-70-5

实验步骤

前处理方法

样品提取

称取5 g样品置于50 mL离心管中，加入20 mL乙酸乙酯，涡旋2 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液至100 mL鸡心瓶中。残渣中再加入20 mL乙酸乙酯，重复提取一次，合并两次上清液于同一100 mL鸡心瓶中，向鸡心瓶中加入0.1 mol/L盐酸溶液4 mL，于40℃旋蒸至3 mL左右，转移至30 mL分液漏斗中，鸡心瓶用2 mL 0.1mol/L盐酸溶液清洗，将清洗液也转移至同一分液漏斗中，再用3 mL正己烷清洗鸡心瓶，也转移至同一分液漏斗中，振摇1 min，静置分层，将下层清液收集于10 mL离心管中，上层清液弃去，再将收集的下层清液倒回分液漏斗中。再用3 mL正己烷清洗鸡心瓶，转移至同一分液漏斗中，振摇1 min，静置分层，转移下层清液至10 mL离心管中，待净化。

样品净化

将PCX小柱依次用3 mL甲醇和3 mL 0.1 mol/L盐酸溶液活化平衡，将待净化液转移小柱上，控制流速1 mL/min左右，弃去流出液，用1 mL 0.1 mol/L盐酸溶液和2 mL 50%甲醇乙腈溶液淋洗小柱，弃去流出液，抽干小柱，最后用4 mL 5%氨化甲醇洗脱，收集流出液于40℃氮吹至近干，用0.1%高氯酸溶液︰甲醇=90︰10（V/V）定容至1 mL，用0.22 µm尼龙针式过滤器过滤，待检测。

色谱条件

色谱柱：Gemini NX-C18，5 µm，110 Å，4.6 × 250 mm；

流动相A：0.1%高氯酸溶液；

流动相B：甲醇；

流速：1 mL/min；

柱温：35℃；

进样量：20 µL；

检测波长：230 nm；

梯度条件：见表2。

表2. 梯度条件

时间/min

A%B%0901059010154060204060

20.1

9010309010

实验结果与讨论

由表3可知，采用PCX小柱净化鸡肉和猪肉样品，回收率均在90% ~ 105%，能够满足检测要求， RSD小于15%，重复性良好。由图1 ~ 图5可知，该方法的净化效果良好，并且，使用Gemini NX-C18色谱柱检测甲氧苄啶，峰型良好良好，保留时间稳定。

表3. 鸡肉、猪肉基质加标回收实验结果

(添加水平10 µg/kg)

物质名称

保留时间/min

平均回收率/%

变异系数/%

鸡肉猪肉鸡肉猪肉甲氧苄啶

14.274

92.3

103.8

10.9

3.9

实验谱图

图1. 0.05 µg/mL甲氧苄啶标准溶液色谱图

图2. 鸡肉基质空白色谱图

图3. 10 µg/kg鸡肉基质加标色谱图

图4. 猪肉基质空白色谱图

图5. 10 µg/kg猪肉基质加标色谱图

结论

本实验建立了鸡肉和猪肉中甲氧苄啶的前处理方法，用固相萃取结合高效液相色谱对加标量为10 µg/kg的样品进行了检测。实验结果表明，对于加标量为10 µg/kg的样品，甲氧苄啶的回收率均在90% ~ 105%之间，且变异系数小于15%，能够满足检测要求，说明该方法可以用于鸡肉和猪肉中甲氧苄啶的检测，且稳定性良好。

产品附录

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

Cleanert PCX

60 mg/3 mL

50支/pk

CX0603

Gemini NX-C18

5 µm，

4.6 × 250 mm