体内药物分析方法
体内药物分析是由药物分析学派生出来的一门学科。它是通过分析人或动物体液及各组织器官中药物及其代谢物浓度,了解药物在体内数量和质量的变化,获得药物代谢动力学的各种参数和转变,以及代谢的方式、途径等信息,从而有助于药物的研究、临床合理应用等。
体内药物分析的特点如下:
灵敏度高:
受到给药剂量的限制
受到生物利用度的限制
浓度低
专一性好:
生物内源性物质的干扰
体内新形成的代谢产物干扰
样品量少:
血液(血浆、血清、全血)
尿、胆汁、唾液、汗、乳汁、精液
粪便、组织器官
方法快捷:
不是专门的方法学研究
利用方法较快的阐明药理学的问题。
可靠、重现性好:
药代实验的不可重复性。
药物类型多:
需要多种仪器、技术手段的配套
体内药物有以下几种分析方式:
光谱分析法
比色法
紫外分光光度法:差示、导数、双波长、三波长
荧光分光光度法
色谱法: 分离效率高; 专一性较高
液相色谱HPLC: 适用范围广; 室温检测; 样品预处理简单;流动相选择范围广; 仪器自动化程度高
气相色谱GC: 化合物气化;载气种类少;方法灵敏,但受到进样量的限制
生物学方法(如微生物法)常能反映药效学本质,但一般特异性较差,应尽可能用特异性高的方法(如色谱法)进行平行检查。
在需要同时测定生物样品中多种化合物的情况下,LC-MS/MS和GC-MS/MS联用法在特异性、灵敏度和分析速度方面有更多的优势。应用放射性核素标记法测定血药浓度应配合色法,以保证良好的检测特异性
TLC: 检测条件受限制
毛细管电泳法: 分离效率高; 专一性较高
毛细管区带电泳
胶束电动毛细管色谱
毛细管凝胶电泳
毛细管等电聚焦
毛细管等速电泳
毛细管电色谱法
免疫分析法:
放射免疫分析
酶免疫分析
荧光免疫分析
放射免疫法和酶标免疫法具有一定特异性,灵敏度高,但原药与其代谢产物或内源性物质常有交叉反应,需提供证据,说明其特异性
同位素法: 灵敏度高; 专一性差
放射强度表示标记药物量(eq.ng/ml)
同位素技术与其他分析法相结合以提高专一性