摘要
本文建立了葛根中葛根素的 HPLC 测定方法。结果表明,按照 2020 版《中国药典》中色谱条件,采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18 分析葛根中葛根素,葛根素的峰形对称,理论塔板数大于 4000,且与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为葛根中葛根素的检测提供参考。
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实验部分
1.1 实验仪器与耗材
仪器配置:Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱: Shim-pack Scepter C18-120(5 μm,4.6×250 mm;
P/N:227-31020-06;S/N:119DA90231);
SHIMSEN Disc针式过滤器(P/N:380-00341);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:
SHIMSEN Pipet PMII-100
SHIMSEN Pipet PMII-1000
RS00431020 葛根素(分析标准品)
1.2 对照品溶液的制备
取葛根素对照品适量,精密称定,加 30%乙醇制成每 l mL 含 80 mg 的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约 0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 30%乙醇 50 mL,称定重量,加热回流 30 分钟,放冷,再称定重量,用 30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(5 μm,4.6×250 mm;
P/N:227-31020-06)
柱温:40℃
检测波长:250nm
流速:1.0mL/min
进样量:10µL
流动相:甲醇:水=25:75
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实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品色谱图如下:
3结论
按照 2020 版《中国药典》中色谱条件,建立了葛根中葛根素的 HPLC 测定方法。结果表明,按照2020 版《中国药典》中色谱条件,采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18-120 分析葛根中葛根素,葛根素的峰形对称,理论塔板数大于 4000,且与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为葛根中葛根素的检测提供参考。
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