影响高效毛细管电泳色谱仪迁移速率的因素有待分离分子的性质、缓冲液pH值、缓冲液离子强度、电场强度、电渗和支持介质的筛孔等。
一、待分离分子的性质:
待分离分子带的电量越大,直径越小,形状越接近球形,迁移速率越大。
二、缓冲液pH值:
缓冲液pH值距离其等电点越远,待分离分子所带净电量越大,迁移速率越大。但pH过高或过低会引起蛋白质变性。
三、缓冲液离子强度:
缓冲液离子强度过低,则缓冲能力差,不易维持pH恒定。
缓冲液离子强度过高,在待分离分子周围形成较强的带相反电荷的离子扩散层(离子氛),降低蛋白质的带电量,使迁移速率变小。
四、电场强度:
电场强度越高,颗粒的迁移速率越大。
五、电渗:
当电渗方向与电泳方向一致时,加快颗粒的迁移速率。反之,当两者方向相反时,减慢颗粒的迁移速率。
六、支持介质的筛孔:
支持介质的筛孔越小,颗粒在移动的过程中受到的阻力越大,迁移速率越小。