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奥林巴斯生化分析仪五十问(四)

2021.4.29
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?

答:试剂空白的吸光度超出设定范围。

解决方法: A 如为试剂变质,则更换试剂; B 重新调整试剂空白的吸光度范围; C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。

( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?

答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。

( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?

答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。

( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?

答: Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40. 常见原因: A. 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。 B. 清洗混匀棒。 C. 更换三通管。

( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?

答: ⑴ .[Parameter]-[System]-[System] 中: Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。

⑵ 在 Online 参数中: 改成 Batch-None-Batch-None 。

⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。

⑷ 重做规则以及相关实验: [Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:

Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; T

Dilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F

相关试验: ALB—TP ; DBIL—TBIL ; CKMB—CK ; TG—LDL 。

( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?

答: ⑴ 定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。 K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:

标准浓度 - 试剂空白

A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )

标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。

⑵ K 值的决定因素: 我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。

⑶ 如何确定 K 值是正确的? 一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。

⑷ K 值的真面目: K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。

⑸ 多长时间定一次标合适? 这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。

⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;

TV ′ 1000

K= ————————

SV ′ L ′ e

二是用有酶项目的定标液得出 K 值: 目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。

( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?

答: Sample vol (样品量) : 2 ~ 50 m l , 可以按 0.5 m l 为单位增减。 Dil vol. ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。

Reagent 1 vol (第一试剂量) : 25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。 Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。

Reagent 2 vol (第二试剂量) : 25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。 Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。

Wavelength Pri: (主波长) Sec. (付波长)

测定波长共有十三种可以选择: 340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。

Method (方法学) 共六种 : End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。

前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。

Reaction (反应方向) : + , - 。 End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。

请记住!向下反应一般来说只有三种: AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。

Point 1 Fst Lst

Point 2 Fst Lst
(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。

End 法: a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例: ALB 为 0—4 ;

b )双试剂(有样品空白功能): 0—27 ; 0—10 。

Rate 法: a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。

b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。

Fixed 法:固定两个点之间去计算。

a) 单试剂苦味酸法肌酐: 1—4 ;尿素氮: 3—8 。

b) 双试剂苦味酸法肌酐: 11—14 ;尿素氮: 12—17 。

Linearity (线性) : Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂: 15% 。

No-Lag-Time : Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。

Min OD L Max OD H (吸光度限)

Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。

Reagent OD Limit Fst. L Fst. H

Lst. L Lst H

试剂空白 OD 限 : Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 0.9—2.5 ,向上的反应 -2.0—0.8 。

Dynamic Range L H : 指的是试剂盒的线性范围。

ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。

Normal Range (正常范围) : 可以按姓别、年龄输入正常范围

None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)

Out of Range 超出范围

Panic Value 报警值

Unit 单位

F7 : Decimal Places 小数位

( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?

答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。 Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。

( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?

答: 国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。

( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?

答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。

RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。


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