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可以考虑,转移缓冲液中加入20%甲醇,因为甲醇可以降低蛋白质洗脱效率,但可增加蛋白质和NC膜的结合能力,甲醇可以防止凝胶变形,甲醇对高分子量蛋白质可延长转移时间;
转移缓冲液中加入终浓度0.1% SDS,也是为了增加转移效率;
用优质的转移膜,或使用小孔径的NC膜,低浓度胶,提高转移电压/电流,增加转移时间。