采血后立即送检，检测操作严格按规范操作。基本步骤是先洗涤已包被抗胰胚抗原抗体的微孔板后，分别加受检标本、阴、阳性参考血清，递经保温洗涤后，加酶标记抗胰胚抗原抗体，同法保温洗涤，加底物显色。
定量测定时，每孔加邻苯二胺和过氧化化氢配制的底物液100μl，置37℃水浴15min，中止反应，观察结果。如作定性测定，最好用四甲基联苯胺（TMB）和过氧化化氢配制的底物液，每孔100μl，置37℃水浴5～15min。结果用酶标比色仪读取A492nm值。定量测定可以参考标准液中的胰胚抗原浓度为横坐标，以测定孔A值为纵坐标，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，按受检标本的A值从表中查知胰胚抗原含量。
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