1. 干粉培养基原倍液的配制
1)配制过滤除菌的细胞培养基
(1) 阅读培养基使用说明,确定需要添加何种添加剂(如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等)。
(2) 根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体积的95%,轻微搅拌溶解。
(3) 加入规定量的碳酸氢钠及所要添加的物质。
(4) 轻微搅拌溶解,加注射用水至规定体积。
(5) 用1 mol / L 氢氧化钠溶液或 1 mol / L 盐酸溶液调pH至所需值。
(6) 用0.22 μm滤膜正压过滤除菌。
(7) 溶液应在2℃-8℃下避光保存。
具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。
2)配制可高压灭菌细胞培养基
(1) 根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体积的95%,轻微搅拌溶解。
(2) 在121℃、15psi下灭菌15分钟。
(3) 待溶液冷却至室温,加入无菌0.2 mol / L L-谷氨酰胺溶液规定体积、无菌7.5%(w/v)碳酸氢钠溶液规定体积,加注射用水(20℃~30℃)至规定体积,混匀。
(4) 如果必要,用1 mol / L 氢氧化钠溶液或 1 mol / L 盐酸溶液调pH至所需值。
(5) 溶液应在2℃-8℃下避光保存。
具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。