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ATS细胞破碎专用设备在实验操作中的实用技巧(一)

2021.3.01
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

生物工艺过程流程图


 
 

 

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      如图所述,细胞破碎是分离纯化的关键第一步, 经过发酵得到细胞后,由于目的产物都在细胞的内部,需用通过高压细胞破碎仪,将细胞破碎开,把胞内产物释放出来,后续的分离纯化才好进行。

 

 


 
ATS细胞破碎专用设备
 

 

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设计原理与技术参数: 

    ATS 细胞专用破碎机主要从三个方面对设备进行专门设计,用以满足细胞破碎提取病毒方面的要求:

   1. ATS 专有的内置冷却模块,可以保证破碎过程中样品都处在 4 度的低温状态

 

   2. ATS 柱塞设计为 2 级夹套隔离,可保证与样品接触的那部分柱塞不与外界接触,进一步可保证生产过程中样品不会染菌,同时设备可以通蒸汽灭菌,也可以用0.5mol以上浓度的 NAHO 溶液浸泡杀菌。

 

   3. ATS 专门针对哺乳动物细胞破碎设计的压力微调模块,破碎压力可以精准调节,精度可达到 1bar,调节后的压力波动范围在±5bar内,可以保证压力稳定,不会破坏病毒的结构。

细胞破碎关键技术细节

破碎率控制

不同的细胞所需要的破碎压力都不一样,ATS 高压细胞破碎的压力可以从 0-2000bar 自由调节,可以满足几乎所有常用表达体系的细胞破碎的需求。

温度控制

由于破碎过程中随着压力的升高,样品温度也会升高,当压力每升高 100bar,样品的温度会升高 2.2℃,生物样品都需要保持低温才能保证样品的活性,ATS 专业的内置冷却模块,可通 4℃的冷冻水直接在样品破碎产热点对样品降温,所产生的热量瞬间就会被吸走,可保证样品温度一直处在低温状态,样品活性不受影响。

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典型细胞破碎介绍

大肠杆菌破碎介绍/典型应用:

大肠杆菌一般需要800-1000bar的压力破碎2-3遍,破碎率可以达到99%以上,常见的典型应用:胰岛素 、干扰素、 白介素 酶等。

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酵母菌破碎介绍/典型应用:

酵母菌一般需要1300bar的压力破碎3-4遍,破碎率可以达到 90%以上,常见的典型应用:HPV疫苗、诺如病毒疫苗、乙肝疫苗、手足口病疫苗等。
 
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酵母后.png
 

动物细胞破碎介绍/典型应用:

哺乳动物细胞主要成分是细胞膜,比较好破碎,一般500bar以内的压力破碎一遍都可以破碎的比较好,因为表达病毒所耐受的压力不同所以破碎压力也不太一 样,破碎压力一般 20bar到500bar。高压破碎仪不光可以破碎细胞,还可以将细胞内部的粘性细胞液,团聚的病毒等均质分散开,可为后续工艺做铺垫,提高病毒的收率。常见的典型应用:水痘疫苗,甲肝疫苗,轮状病毒疫 苗,溶瘤病毒(腺病毒,腺相关病毒,单纯疱疹病毒等) 以及一些常见的动物用的灭活病毒疫苗。
 


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