锌离子在许多生理和病理过程中都起到至关重要的作用,因此对锌离子进行探测和识别有重要理论和实际意义。荧光探针因其设计简单、易于操作、灵敏度高、可细胞成像等诸多优点而广泛应用于锌离子的识别研究。
锌是生物中含量第二高的过渡金属(仅次于铁), 大脑中大多数Zn 2+紧密结合,因此细胞外和细胞内的游离Zn 2+水平可能为pmol级,但一部分谷氨酸能神经元在突触前按钮中具有弱结合的锌,这部分的锌会以u mol水平释放,从而响应各种刺激,在大多数细胞中,游离Zn 2+的细胞内浓度极低(<1 nM),其余的则与蛋白质或核酸结合。
越来越多的证据表明,锌在细胞生物学中具有多种作用,作为金属酶催化位点的一部分,作为基因调节蛋白的结构成分,以及作为自由信号离子,特别是在大脑皮层中, 这在基因表达的调节中特别重要,因为Zn 2+结合蛋白占人类基因组中转录调节蛋白的近50%。Zn 2+在胰腺胰岛素分泌中也具有功能活性,同时也是包括癫痫病和阿尔茨海默氏病在内的神经系统疾病的一个促成因素, 氧化应激期间,金属蛋白复合物中会释放出游离的Zn2 +。
在了解了锌的多种作用后,下面我们来看看荧光Zn 2+指示剂系统,该系统可使用荧光显微镜和流式细胞术对细胞内和细胞外的锌通量和水平上的宽浓度范围内的锌通量和水平进行定量测定及成像。目前,我们提供经典的TSQ,zinquin以及我们新开发的灵敏的Metal Fluor™Zn 520,以帮助阐明胞内Zn 2+释放的作用以及游离或可螯合Zn 2+在细胞中的定位。
锌指标选择指南
TSQ | Zinquin, AM | Metal Fluor™ Zn 520 AM | Metal Fluor™ Zn 520 K+ | |
检测原理 | 指示剂对锌的饱和水平作出反应,荧光发射随锌离子浓度显著增加 | |||
Ex/Em (nm) | 344/385 | 360/480 | 490/514 | 490/514 |
滤光片 | DAPI | FITC | ||
渗透性 | 可渗透 | 可渗透 | 可渗透 | 不可渗透 |
染料加载 | 加载到细胞培养基中 | 通过显微注射,贴片移液器或松果体加载剂加载 | ||
规格 | 5 mg | 1 mg | 1 mg | 1 mg |
货号 | 21254 | 21261 | 21263 | 21262 |