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高效液相色谱配示差检测器测定蜂蜜及糖类的方法

2020.1.08
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

一、原理:样品溶于水后,用0.45μm滤膜过滤,用液相色谱差示折射率检测器测定,外标法定量。

二、 试剂和材料

1.乙腈:色谱纯。

2.水为GB/T 6682规定的一级水

3.果皮,葡萄糖,蔗糖,麦芽糖标准物质纯度≥99%

4.果糖葡萄糖标准储备液:果糖标准品5g,葡萄糖标准品4g,准确称取0.0001g,置于同一100ml容量瓶中,溶于60ml水中。它们与尼泊金乙酯体积摇匀。

5.蔗糖,麦芽糖标准溶液重2g蔗糖和2g麦芽糖标准品,准确至0.0001g,放入相同的100 ml容量瓶中加入人60 ml水溶解用乙基蜡体积,摇匀。

6.果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作液:吸取不同体积的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作液,用十水乙二醇(40+60)稀释至一定体积,配制果糖、葡萄糖、蔗糖标准工作液。并用不同浓度的麦芽糖绘制标准工作曲线。

三、仪器

高性能液相色谱仪:配有差分折射率检测器。

分析天平传感器各0.1mg和0.001g

注射器:10ml。

有机相过滤膜:0.45um

样品瓶:1.5ml。

容量瓶:10毫升,25毫升,50毫升100毫升

四、试样制备与保存

1.样品制备:非结晶实验室样品,搅拌均匀。对于有结晶的样品,在密封条件下,样品在不超过60℃的水浴中加热振荡。在所有样品熔化后,样品被搅拌并冷却到室温。0.5公斤作为样品分离。准备好的样品放置在样品瓶中,密封并标记。

2.样品保存:样品在室温下保存。

五、 测定步骤

1.提取:取5g样品,准确至0.001g放入100ml烧杯中加入30ml水,用玻璃棒搅拌使试样完全溶解,移入100ml容量瓶中,再用10ml水冲洗三次,移入100ml以上容量瓶中,用乙腈定容,混匀,样品液经0.45μm滤膜过滤进入人样品瓶中进行液相色谱。

2.液相色谱条件:

色谱柱:碳水化合物分析柱10um300 mm x 3.9mmd

流动相:B水(77 23);

流速:1.0ml/min ;

柱温 ;25℃;

检测器池温度:35℃ ;

进样量,15uL ,

3.液相色谱法测定:以峰高为纵坐标,工作液浓度为横坐标,绘制样品溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的标准工作曲线。以确保样品溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的响应值在标准工作曲线的线性范围内取样品溶液和标准工作溶液等体积进行测定在上述色谱条件下,果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的分离度应大于1.5。


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