食品检测技术--样品预处理常用的分离与富集方法

常用的分离与富集方法

1、萃取法

萃取法又叫溶剂分层法,是利用某组分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同,使其从一种溶剂转移到另一种溶剂中,从而与其他组分分离的方法。此法操作迅速,分离效果好,应用广泛。但萃取试剂通常易燃、易挥发,且有毒性。萃取溶剂的选择原则:萃取用溶剂应与原溶剂互不相溶,对被测组分有最大溶解度,而对杂质有最小溶解度,即被测组分在萃取溶剂中有最大的分配系数,而在杂质只有最小的分配系数。经萃取后,被测组分进入萃取溶剂中,即与留在原溶剂中的杂质分离开。此外,还应考虑两种溶剂分层的难易以及是否会产生泡沫等问题。萃取的方法:萃取通常在分液漏斗中进行,一般需经4～5次萃取才能达到完全分离的目的。当用较水轻的溶剂从水溶液中提取分配系数小或振荡后易乳化的物质时,采用连续液体萃取器比分液漏斗的效果更好。在萃取时,特别是当溶液呈碱性时,常常会产生乳化现象,影响分离。

破坏乳化的方法有:①静置较长时间;②旋摇漏斗,加速分层;③若因两种溶剂(水与有机溶剂)部分互溶而发生乳化,可以加入少量电解质(如氯化钠),利用盐析作用加以破坏,若因两相密度差小而发生乳化,也可以加入电解质,以增大水相的密度;④若因溶液呈碱性而产生乳化,常可加入少量的稀盐酸或采用过滤等方法消除。根据不同情况,还可以加入乙醇、磺化蓖麻油等消除乳化。

2、固相萃取

固相萃取利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,或加热解吸附达到分离和富集目标化合物的目的。一般分为活化吸附剂、上样、洗涤和洗脱四个步骤。在萃取样品之前要用适当的溶剂淋洗固相萃取柱,以消除吸附剂上吸附的杂质及其对目标化合物的干扰,激活固定相表面的活性基团的活性。活化通常采用两个步骤,先用洗脱能力较强的溶剂洗脱去柱中残存的干扰物,激活固定相;再用洗脱能力较弱的溶剂淋洗柱子,以使其与上样溶剂匹配。上样是将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的固相萃取柱中。洗涤和洗脱是在样品进入吸附剂、目标化合物被吸附后,先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉,然后再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来,加以收集。其他方法有固相微萃取法、超临界流体萃取法、蒸馏与挥发法和膜分离法。