硫酸依替米星的检查方法

检查

酸度取本品,加水制成每1ml中含50mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为4.0~6.5。溶液的澄清度与颜色取本品5份,分别加水制成每1ml中含75mg的溶液,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或黄绿色2号标准液(通则0901第一法)比较,均不得更深。硫酸盐照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液对照品溶液(1)精密量取硫酸滴定液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含硫酸盐(SO4)0.075mg的溶液。对照品溶液(2)精密量取硫酸滴定液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含硫酸盐(SO4)0.15mg的溶液。对照品溶液(3)精密量取硫酸滴定液适量,用水定量稀释制成每1ml中约含硫酸盐(SO4)0.30mg的溶液。系统适用性溶液与色谱条件见有关物质(第二法)项下。系统适用性要求见有关物质(第二法)项下。对照品溶液(1)~(3)色谱图中,以对照品溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算线性回归方程,相关系数(r)应不小于0.99。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)~(3),分别注人液相色谱仪,记录色谱图限度用线性回归方程计算供试品中硫酸盐(SO4)的含量。按无水物计算应为31.5%~35.0%。有关物质第一法照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含依替米星0.25mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取依替米星对照品和奈替米星标准品各适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中各约含0.025mg的混合溶液。灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含依替米星0.25μg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm,5μm或效能相当的色谱柱),以0.2mol/L三氟醋酸溶液(含0.05%五氟丙酸,1.5g/L无水硫酸钠,0.8%(V/V的50%氢氧化钠溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至3.5)-乙腈(96:4)为流动相,流速为每分钟1.0ml,柱温为35℃,用积分脉冲安培电化学检测器检测,检测电极为金电极(推荐使用3mm直径),参比电极为Ag/AgCl复合电极,钛合金对电极,四波形检测电位(见下表),柱后加碱(50%氢氧化钠溶液1→25,推荐流速每分钟0.5m1);进样体积25l。时间(秒钟)电位(V)积分+0.10开始0.40+0.10结束0.43+0.600.100,10系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,依替米星峰和奈替米星峰之间的分离度应大于4.0。灵敏度溶液色谱图中,依替米星峰峰高的信噪比应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,奈替米星按校正后的峰面积计算(乘以校正因子0.8),不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(2.5%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(2.5%),各杂质校正后峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。第二法照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含依替米星2.0mg的溶液。对照溶液取依替米星对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含依替米星2.0mg的溶液 对照溶液(1)精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中含依替米星20μg的溶液对照溶液(2)精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中含依替米星50g的溶液对照溶液(3)精密量取对照溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中含依替米星0.lmg的溶液。系统适用性溶液取依替米星对照品与奈替米星标准品各适量,加水溶解并稀释制成每1ml中各含0.2mg的混合溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(pH值范围0.8~8.0);以0.2mol/L三氟醋酸溶液甲醇(84:16)为流动相;流速为每分钟0.5ml;用蒸发光散射检测器检测(参考条件漂移管温度100℃,载气流速为每分钟26L);进样体积20l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,依替米星峰与奈替米星峰之间的分离度应大于1.2。对照溶液(1)~(3)色谱图中,以对照溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算线性回归方程,相关系数(r)应不小于0.99。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液(1)~(3),分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰(硫酸峰除外)用线性回归方程计算,单个杂质不得过2.5%,杂质总量不得过5.0%,小于对照溶液(1)主峰面积0.02倍的峰忽略不计。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第二法)测定供试品溶液取本品约0.12g,精密称定,置顶空瓶中,精密加水3ml使溶解,密封对照品溶液取二氯甲烷适量,精密称定,用甲醇定量稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液,精密量取适量,用水定量稀释制成每1ml中含24μg的溶液,精密量取3ml,置顶空瓶中,密封。色谱条件以5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱,初始温度为50℃,保持5分钟,以每分钟35℃的速率升至200℃;检测器温度为260℃;进样口温度为120℃。顶空瓶平衡温度为85℃,平衡时间为30分钟测定法取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,二氯甲烷的残留量应符合规定。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过10.0%。炽灼残渣取本品1.0g,依法测定(通则0841),遗留残渣不得过0.5%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之二十可见异物取本品5份,用微粒检查用水溶解,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)不溶性微粒取本品3份,用微粒检查用水制成每1ml中含60mg的溶液,依法检查(通则0903),每1g样品中,含 10ym及10m以上的微粒不得过6000粒,含25m及25m以上的微粒不得过600粒。(供无菌分装用)细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg依替米星中含内毒素的量应小于0.50EU。(供注射用)