PCR仪反应主要步骤

PCR仪的要素

基本的PCR须具备

1.要被复制的DNA模板 Template

2.界定复制范围两端的引物Primers.

3.DNA聚合酶Taq. Polymearse

4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。

    PCR仪工作原理

    利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。

    PCR的反应包括三个主要步骤
1. Denaturation 
2. Annealing of primers,
3. Extension of primers。 
    所谓 Denaturing乃是将DNA加热（至90~95℃）变性， 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下（冷却至55~60℃）附着于模板DNA两端。 zui后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下（加热至70~75℃）进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。

    PCR的zui早设想核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年zui早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。