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热点应用丨如何对不平整样品进行完美拉曼成像?

天美公司分析仪器
2022.7.21
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天美仪拓实验室设备(上海)有限公司

在制药行业,了解片剂的成分对于研发和质量控制都很重要。显微拉曼是进行此类分析的完美技术,其指纹级别的光谱识别意味着活性药物成分 (API) 可以通过获得的结晶度和多态性的细节进行轻松区分。当与共聚焦显微镜耦合时,我们现在可以获得有关API 分布的全面信息。

显微拉曼是一种非破坏性技术,这意味着可以对整个药片进行分析,而不会对其结构或有效性造成任何破坏风险。整个药片都可以进行拉曼成像,这种方法的存在的一个问题,药片并不是完全平坦的。表面粗糙,药片经常印有字母或中间有一个凹陷,可以快速分割成半剂量。



爱丁堡共聚焦显微拉曼光谱仪

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图1. (a)RM5与(b)RMS1000拉曼光谱仪

RM5和RMS1000拉曼光谱仪本质上都是真正的共聚焦,并提供一系列激发波长。RM5最多可容纳3个内置激光器,RMS1000最多可容纳5个内置激光器,还可增加额外的外部激光器;这两款仪器每个光谱仪都能够容纳多达5块计算机控制的光栅;RM5最多可集成2个检测器,对于升级版的RMS1000最多可集成4个检测器,以涵盖不同领域的所有应用。使用RM5和RMS1000的Ramacle® 软件生成数据图,以提供对样品成分和分布的深入了解。9229a1109aa4f437d5b4efffbf759c50.png

图2: (a) 单个 Z 点处的离焦白光图像,(b) 表面成像的2D 视图,(c) 表面成像的3D形貌视图

Ramacle® 软件使用Surface Mapping功能来处理带有不平坦的表面样品。Surface Mapping功能通过在整个样品表面高度获取 Z轴堆叠图像并处理它们以形成一个最佳聚焦图像,获得完全聚焦的表面图像,如图2。每个XY点的最佳聚焦Z轴值存储在Ramacle®中,因此拉曼成像时,可以确保所有点都完全聚焦,如图 3。733e0aa2e26fb8e6154abf83e8cb6271.png

图3: 药片的伪色3D拉曼成像图(左)及其光谱(右)的。蓝色为扑热息痛,橘红色为阿司匹林,绿色为咖啡因。

图 3 显示了生成的拉曼表面成像图,该图显示了整个测量过程中样品都处在聚焦的状态。可以清楚地看到片剂的表面形状,3 种 API 在空间上得到很好的分辨,分别为扑热息痛(蓝色)、阿司匹林(橘红色)和咖啡因(绿色)。



Ramacle® Software

If you would like to know more our Ramacle® Software Highlight: Surface Mapping video gives a more thorough explanation on how to handle uneven surfaces.

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