病原微生物的种类繁多,包括属于真核微生物的真菌、厉于原核微生物的细菌(抗酸杆菌)、来自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。这些物质的化学成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通过氧化剂或直接加热条件下,可使染色剂与物质结合而形成牢固的复合物。
实验方法原理 | 真菌是常见的致病菌,其成分含有较多的黏多糖和蛋白质,通过氧化剂,能够促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再与 Schiff 试剂进行结合,生成新的复红复合物而显示真菌的存在,常用高碘酸-复红染色法。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 高碘酸氧化剂:高碘酸 0.5 g,蒸馏水 99 ml。 Schiff 试剂染色液(参见糖原染色液)。 1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。 2. 高碘酸氧化剂处理 10 min,流水洗 2 次。 3. 蒸馏水洗 2 次,Schiff 试剂染色液处理 20 min 左右,15℃ 以下时在湿盒内加入 50℃ 温水,可加快染色时间。 4. 浸入自来水洗 2 min,明矾-苏木精进行复染 10 s。 5. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。 展开 |
注意事项 | 1. 高碘酸氧化剂置冰箱内保存,可用较长时间。 2. Schiff 试剂染色后,不宜水洗时间较长,以免背景较深。 |
其他 | 结果:真菌呈紫红色,背景无色。 |