动物疫病检测，赛默飞KingFisher助力复杂样本前处理

天气转暖，草长莺飞，又到了动物疫病易感、易发、易传播的春季。今天小赛给大家分享下动物疫病检测相关的内容。

动物疫病，是指动物传染病，包括寄生虫病。根据动物疫病对养殖业生产和人体健康的危害程度，动物疫病可分为三类：

一类疫病，是指口蹄疫、非洲猪瘟、高致病性禽流感等对人、动物构成特别严重危害，可能造成重大经济损失和社会影响，需要采取紧急、严厉的强制预防、控制等措施的，共11种；

二类疫病，是指狂犬病、布鲁氏菌病、草鱼出血病等对人、动物构成严重危害，可能造成较大经济损失和社会影响，需要采取严格预防、控制等措施的，共37种；

三类疫病，是指大肠杆菌病、禽结核病、鳖腮腺炎病等常见多发，对人、动物构成危害，可能造成一定程度的经济损失和社会影响，需要及时预防、控制的，共126种。

参考：农业农村部《中华人民共和国动物防疫法》《一、二、三类动物疫病病种名录》

按动物疫病的常见病原体类型分类

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常见病毒性疫病

非洲猪瘟

图片来自百度百科

由非洲猪瘟病毒ASFV（双链DNA病毒）感染引起，主要感染家猪、野猪，是一种急性、接触性传染病。以高热、内脏器官严重出血和高死亡率为特征。2018年传入中国，累计的直接损失预估有一万亿。非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室荧光定量PCR或ELISA检测确诊。

口蹄疫

图片来自搜狐《养牛春节口蹄疫高发时期，这些方法要试一下！》

由口蹄疫病毒（单正链RNA病毒）感染引起，主要感染牛、羊、猪等偶蹄类动物，是人畜共患病，具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点，疫区发病率可达50%~100%，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类传染病之首。

禽流感

图片来自快科技《7700万家禽遭捕杀！传播了26年的禽流感 为何毒性没减弱？》

由甲型流感病毒（RNA病毒）引起的一种从呼吸系统到严重全身败血症等多种症状的禽类传染病。当病毒在复制过程中发生基因重配，产生能感染人的压型，其中，高致病性H5N1亚型和H7N9亚型尤为引人关注，不仅重创了家禽养殖业，同时造成了人类的伤亡。

常见细菌性疫病

奶牛布鲁氏菌病

图片来自嘉峪关市农业农村局《奶牛布氏杆菌病（布病）简介及综合防治》

由牛种布氏杆菌（革兰氏阴性菌）感染所致，会引起流产、死胎、胎盘滞留、关节炎等症状，是一种人畜共患传染病，世界动物卫生组织将其列为B类动物疫病和必须通报疫病。

动物疫病检测方法

动物疫病检测是动物疫病防控中十分重要的一部分。《中华人民共和国动物防疫法》明确指出：国家实行动物疫病监测和疫情预警制度。要求县级以上人民政府建立健全动物疫病监测网络，加强动物疫病监测。

动物疫病检测可采用多种手段：包括血凝试验、ELISA、RT-PCR终点法、实时荧光定量PCR（qPCR）等。其中实时荧光定量qPCR方法是灵敏度更高、更方便快速的分子诊断方法之一。

动物疫病分子生物学检测方案

赛默飞世尔科技提供动物疫病分子生物学检测方案，使用Thermo Scientific™ KingFisher™ 全自动核酸提取仪进行病毒/细菌核酸提取，后续通过 Applied Biosystems™ 实时荧光定量PCR仪进行检测，拥有准确、简单、快速的特点。

动物疫病分子生物学检测流程，来自赛默飞

对于病毒性的疫病检测，KingFisher自动核酸提取仪配套MagMAX磁珠法核酸提取试剂盒，可以从血清、组织、拭子、病毒保存液等样本中提取DNA或RNA病毒，15分钟即可完成96个样本的上机提取，提取效率、均一性和重复性更好。

常见病毒性疫病核酸提取样品类型，来自赛默飞

对于细菌性的疫病检测，为了提高检出率和准确性，一般会进行细菌培养，通过涂平板、摇菌，增大样本量， 使用配套试剂盒在KingFisher自动核酸提取仪上进行革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的DNA提取。

KingFisher自动化核酸提取方案不仅可以用于动物疫病的常规检测，还可以用于动物疫病的研究和疫苗的研发。

中国动物疫病预防控制中心建立了一种伪狂犬病病毒微滴数字PCR (ddPCR) 的检测方法，使用KingFisher自动核酸提取仪从猪脑和肺样品中提取病毒RNA，下游进行qPCR和ddPCR评估。

来自“畜牧兽医学报”官网

美国农业部， 纽约西奈山医学院在禽流感及新城疫鉴定、疫苗开发过程中，使用KingFisher自动核酸提取仪从鸡的口腔或泄殖腔拭子中提取病毒RNA，并进行实时RT-PCR。

来自www.sciencedirect.com

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