兔You · 动物性食品中左旋咪唑残留量的检测

　　左旋咪唑是一种广谱抗线虫药，具有特殊免疫调节功能，不合理的使用会造成左旋咪唑在动物体内残留。过量摄入左旋咪唑可引起致癌、致癌反应、脑炎综合征等病症，所以要严格控制左旋咪唑在养殖行业中的使用，以减少左旋咪唑在动物体内的残留。

　　迪马科技参考国标《GB 31658.21-2022 食品安全国家标准 动物性食品中左旋咪唑残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，建立了SPE-UPLC-MS/MS法测定动物性食品中左旋咪唑的残留，本方案在碱性条件下用乙酸乙酯提取，0.1mol/L盐酸溶液萃取，ProElut PXC混合型阳离子交换固相萃取柱净化，Endeavorsil C18色谱柱分离检测，回收率在80%-100%之间，定量限为1.0μg/kg。

　　本方案具有提取方法简单、回收率高、净化效果优异、方法稳定性好等优点，可供大家参考。

本方案适用于猪、禽、牛的肌肉、肝脏中左旋咪唑残留量的检测。

2.1 碳酸氢钠饱和溶液：取水100mL，加无水碳酸氢钠至不溶解，取上清液，现用现配；

2.2 碳酸钠饱和溶液：取水100mL，加无水碳酸钠至不溶解，取上清液，现用现配；

2.3 碳酸盐缓冲液：取碳酸氢钠饱和溶液90mL、碳酸钠饱和溶液10mL，混匀；

2.4 0.1mol/L盐酸溶液：取盐酸9mL，加水稀释到1000mL，混匀；

2.5 10%乙腈甲酸溶液：取乙腈10mL用0.1%甲酸水溶液稀释到100mL，混匀。

3.1 左旋咪唑标准储备液：准确称取适量左旋咪唑标准品，用甲醇溶解配制成标准储备液1mg/mL；

3.2 左旋咪唑中间液：准确吸取适量左旋咪唑储备液，用甲醇配制成左旋咪唑中间液，浓度为100ng/mL。

4.1 称取2.0g样品于50mL塑料离心管中；

4.2 向离心管中加入0.5mL碳酸盐缓冲液(2.3)，2g无水硫酸钠，10mL乙酸乙酯；

4.3 涡旋5min，8000rmp离心2min，取上层乙酸乙酯至另一离心管中；

4.4 残渣用10mL乙酸乙酯重复提取一次，合并两次提取液；

4.5 向提取液中加入5mL 0.1mol/L盐酸溶液(2.4)，涡旋5min，8000rmp离心2min；

4.6 取下层水相至另一离心管中，有机相再加5mL 0.1mol/L盐酸溶液重复萃取一次；

4.7 合并两次萃取液，备用。

ProElut PXC 60mg/3mL (Cat.#: 68203)

(1)活化：用3mL甲醇和3mL 0.1mol/L盐酸溶液活化小柱；

(2)上样：将备用液全部上柱，弃去流出液；

(3)淋洗：依次用3mL水、3mL甲醇淋洗小柱，弃去流出液，推干；

(4)洗脱：用3mL 4%氨水甲醇洗脱小柱，推干，接收流出液；

(5)重新溶解：将流出液在40℃水浴氮吹至干，用1mL 10%乙腈甲酸溶液(2.5)溶解残渣，超声1min,混匀，过尼龙膜(Cat.#: 37177)，上机分析。

注：基质匹配标准溶液的制备：取适量左旋咪唑标准品中间液（3.2），加入经提取、净化步骤处理的空白试料洗脱液中，于40℃水浴氮吹至干，用1mL 10%乙腈甲酸溶液溶解残渣，超声1min，混匀，过尼龙膜(Cat.#: 37177)，上机分析。

UPLC条件

色谱柱：Endeavorsil C18, 50x2.1mm, 1.8μm  (Cat.#: 87002)

流速：0.3mL/min

进样量：2μL

柱温：35℃

流动相：A: 0.1% 甲酸水溶液 B: 甲醇

质谱条件

电离模式：ESI

扫描方式：正离子扫描

检测方式：多反应监测

电喷雾电压：5500V

雾化气压力：50psi

辅助气压力：50psi

气帘气压力：20psi

离子源温度：500℃